滅菌前先將各排氣閥打開，將蒸汽引入夾套或蛇管進行預熱，待罐溫升至80~90℃，將排氣閥逐漸關小。接著將蒸汽從進氣口、排料口、取樣口直接通入罐中（如有沖視罐也同時進汽），使罐溫上升到118~120℃，罐壓維持在0.09~0.1Mpa（表壓），并保持30min左右。各路進氣要暢通，防止短路逆流，罐內(nèi)液體翻動要激烈；各路排汽也要暢通，但排汽量不宜過大，以節(jié)約用氣量。在保溫階段，凡進口在培養(yǎng)基液面以下的各管道及沖視鏡管都應進汽；凡開口在液面之上者均應排汽。

 

       無論與罐連通的管路如何配制，在實消時均應遵循“不進則出”的原則。這樣才能保證滅菌徹底，不留死角。保溫結束后，依次關閉各排汽、進汽閥門，待罐內(nèi)壓力低于空氣壓力后，向罐內(nèi)通入無菌空氣，在夾套或蛇管中通冷卻水降溫，使培養(yǎng)基的溫度降到所需的溫度，進行下一步的發(fā)酵和培養(yǎng)。